种子自身因素

种子成熟度：成熟度高的三叶草种子，内部营养物质积累充足，胚发育完全，具有较高的发芽潜力。而未成熟的种子，可能因营养不足、胚发育不完全等原因，导致发芽率低或无法发芽。

种子活力：种子活力与种子的储存时间、储存条件等有关。新采收且储存得当的种子活力高，发芽速度快且发芽率高。随着储存时间延长，种子活力逐渐下降，发芽能力也会减弱。此外，储存过程中如果环境温度、湿度不适宜，如高温高湿，会加速种子的老化和变质，降低种子活力。

种子完整性：种子在采收、处理或储存过程中，如果受到机械损伤、虫害等，导致种皮破损或胚受损，会影响种子的正常发芽。种皮破损可能使种子在萌发过程中水分吸收过快或受到病菌侵害，而胚受损则直接影响种子的萌发和幼苗的生长。

外部环境因素

温度：三叶草种子发芽需要适宜的温度范围，一般在 15 - 25℃之间。温度过低，种子的生理活动会受到抑制，发芽速度缓慢甚至停滞；温度过高，会使种子呼吸作用过强，消耗过多的营养物质，也不利于发芽。不同品种的三叶草对温度的要求可能略有差异。

水分：水分是种子萌发的关键因素之一。种子在萌发前需要吸收足够的水分，使种皮膨胀、软化，便于氧气进入和胚根突破种皮。但如果土壤水分过多，会导致土壤通气性变差，种子缺氧，从而引起腐烂；而水分不足，种子无法吸胀，也不能正常发芽。

氧气：种子萌发过程中需要进行呼吸作用，以提供能量支持萌发和生长。因此，土壤或播种基质需要有良好的透气性，保证种子能够获得充足的氧气。如果土壤过于紧实或积水，会导致氧气供应不足，影响种子发芽。

光照：光照对三叶草种子发芽的影响因品种而异。有些三叶草种子在光照条件下能更好地发芽，而有些则对光照不敏感，甚至在黑暗条件下发芽更好。在播种时，需要了解所种植的三叶草品种对光照的需求特性，以提供合适的光照条件。

土壤条件：土壤的质地、酸碱度和肥力等对三叶草种子发芽有重要影响。疏松、肥沃、排水良好的土壤有利于种子发芽和幼苗生长。过于黏重的土壤通气性和透水性差，不利于种子萌发；而过于沙质的土壤保水保肥能力弱，也会影响种子发芽。土壤的酸碱度以 pH 值在 6.0 - 7.5 为宜，过酸或过碱的土壤可能会影响种子对养分的吸收，从而抑制发芽。