狗舌草通过播种或者组织培养进行繁殖。野外通常是种子繁殖，种植业使用的是组织培养繁殖。

1、愈伤组织诱导

将无菌嫩茎切成0.2-0.3厘米的茎段后，平放于培养基表面上，再接种MS+KT0.3毫克/升+2,4-D1.5毫克/升+NAA1.0毫克/升培养基上进行诱导。

2、愈伤组织的继代增殖培养

将上述培养的愈伤组织用解剖刀分散成为由4-6个颗粒组成的愈伤组织块后，接种到嫩茎愈伤组织诱导培养的MS+KT0.3毫克/升+2,4-D1.5毫克/升+NAA1.0毫克/升培养基上，进行愈伤组织的继代增殖培养。

3、愈伤组织的分化培养

把以上在MS+KT0.3毫克/升+2,4-D1.5毫克/升+NAA1.0毫克/升培养基上继代增殖培养的颗粒状愈伤组织，分散为独立的颗粒后，再分别接种到1/2MS+IAA0.2毫克/升+GA31.0毫克/升培养基上培养。

4、不定芽生根培养

将在1/2MS+IAA0.2毫克/升+GA31.0毫克/升培养基上分化培养的不定芽从基部剪下，将其下部切口置于浓度为1.0毫克/升的NAA溶液中处理2分钟后，把下部切口插入接种到1/3MS+IAA0.2-0.4毫克/升的培养基上培养。

5、试管苗的生根继代培养

将试管苗从基部剪下后取出，放到无菌培养皿中，用解剖刀切成具有3个叶片的茎段后，再将茎段最下部的1个叶片剪掉，接着，把无叶片的下部茎插入到生根培养基中进行试管苗的生根继代培养。生根继代培养的培养基为1/3MS+IAA0.2-0.4毫克/升+NAA0.1毫克/升+GA30.4毫克/升。

6、试管苗炼苗、移栽与定植

将生长在继代培养试管苗的培养瓶瓶塞打开，放在温室的光照下炼苗3天，用镊子将试管苗取出后，用约20℃的清水洗净根部培养基，再移栽于温室中的营养钵内。营养钵上半部为干净河沙，下半部为肥沃山皮土。